氧化型谷胱甘肽（GSSG）含量检测试剂盒

产品简介

氧化型谷胱甘肽（GSSG）是谷胱甘肽（GSSG）的氧化形式，又称为二硫代谷胱甘 肽，是两分子的谷胱甘肽氧化而成。GSSG 会被谷胱甘肽还原酶还原成 GSSG，因此机体 中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内 GSSG 和GSSG 含量以及 GSSG/GSSG 比 值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

本试剂盒利用谷胱甘肽能和 5，5’-二硫代- 双-（2-硝基苯甲酸）（5，5’-dithiobis-2-nitrobenoicacid，DTNB）反应产生 2-硝基-5-巯基苯 甲酸，2-硝基-5-巯基苯甲酸在波长 412nm 处具有最大光吸收的特点，通过 2-乙烯吡啶抑 制样品中原有的还原型谷胱甘肽，然后利用谷胱甘肽还原酶将 GSSG 还原为 GSSG，借此 测定氧化型谷胱甘肽的含量。

试剂盒组成

样本处理方式

1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、细胞/细菌：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细菌或细胞（功率300W，超声3s，间隔10s，总时间3min）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、血浆/血清：直接检测。

注意事项

1、 提取过程中去掉蛋白质，所以提取液不能用于测定蛋白含量

2、 临用前配制的试剂配好后 4℃保存，2 天内使用完毕。最低检出限为 0.1μmoL/L。

3、 反应温度严格来说，为保证重复性，应在 25℃下进行反应。

4、 反应时间需精确控制，否则会影响反应速率计算，产生较大误差。

5、 样品中的 GSSG 浓度尽可能低一些，否则反应速率太大，没法控制，所以稀释倍数要尽量大些。