YFX0472
100管/48样
¥2270
微量法
细胞色素P450酶是一组在外源物质代谢中,尤其是药物和毒物,具有重要作用的酶系。AND作为P450酶系的重要一员,相当于CYP3A4亚型,与药物的去甲基化反应密切相关。
AND催化氨基比林释放甲醛,通过Nash比色法测定甲醛含量,即可计算出AND活性。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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试剂一 |
粉剂 ×1瓶:临用前加入100mL蒸馏水充分溶解。 |
4℃ |
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试剂二 |
液体 ×1瓶:临用前置于37℃水浴中预热30min。 |
4℃ |
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试剂三 |
粉剂 ×1管:临用前加入1mL无水乙醇充分溶解。 |
4℃,避光 |
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试剂四 |
粉剂 ×1管:临用前加入0.5mL蒸馏水充分溶解。 |
4℃ |
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试剂五 |
粉剂 ×1瓶:临用前加入4mL蒸馏水充分溶解。 |
室温 |
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试剂六 |
液体 ×1瓶 |
室温 |
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试剂七 |
液体 ×1瓶 |
4℃ |
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标准液 |
液体×1瓶:临用前取1.5mL EP管,加入10μL标准液,加990μL蒸馏水,混匀即为0.05 mmoL/L标准甲醛溶液,4℃保存。 |
-20℃ |
1、除去细胞核,线粒体等大分子物质:称约0.5g组织,加入1 mL试剂一,冰上充分研磨,10 000g 4℃离心30min,取上清液转入超速离心管。
2、粗制微粒体:4℃,100 000g,离心60min,弃上清液。
3、除血红蛋白等杂质:向步骤2的沉淀中加1mL试剂一,盖紧后充分震荡溶解,100 000g离心30min,弃上清液。
4、最终微粒体:向步骤3的沉淀中加试剂二0.5 mL,盖紧后充分震荡溶解,即粗酶液,待测。该待测液需当天使用。
1、粗酶液需在当日完成测定,如需保存,则向粗酶液提取步骤3的沉淀中加0.5mL 20%的甘油,分装后,-80℃保存。
2、试剂三和试剂四需临用前配制,如当天没有用完,4℃避光保存,可用1周。
3、粗酶液可直接用于蛋白浓度测定,建议用BCA法测蛋白含量。