谷丙转氨酶（ALT/GPT）活性检测试剂盒

产品简介

谷丙转氨酶（ALT/GPT）（EC 2.6.1.2）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞 GPT 活性很高，当肝细胞坏死，GPT 释放到血液中，血清 GPT 活性显著增高。因此，GPT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。

谷丙转氨酶（ALT/GPT）催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入 2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色， 可以在 505nm 读取吸光值并计算酶活力。

试剂盒组成

样本处理方式

1、组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g  4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、细胞/细菌：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g  4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

3、血浆/血清：直接检测。对照管若煮沸后血清出现凝固，可以进行8000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。

注意事项

1、 标准曲线线性范围为：0.01μmoL/mL -2μmoL/mL

2、 ΔA 线性范围为：0.01 -1。

3、 若血清样本量不够，需将样本用生理盐水或PBS缓冲液稀释适当倍数，再进行实验操作，计算公式中乘以相应稀释倍数。