产品简介
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
强碱性溶液中,双缩脲与 CuSO4 形成紫色络合物;紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为 1~10mg 蛋白质,适用于蛋白质浓度高的样品,尤其是动物材料。
样本处理方式
1、组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g组织,加入 1mL 提取液( 自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水)冰浴匀浆,8000g,4℃离心 10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)
2、细菌、真菌:按照细胞数量(10
4个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3、液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。
注意事项
1、空白管和标准管只需测定一次。
2、样品蛋白浓度须在 1~10mg/ml 范围内,低于 1mg/ml 不能用此法,高于 10mg/ml 须做相应稀释。因此测定前用 1~2 个样做预实验,确保蛋白浓度在 1~10mg/ml 范围内。
3、待测样品蛋白提取可用生理盐水、双蒸水或不含蛋白的PBS提取。该法受硫酸铵、Tris 缓冲液干扰,提取液中应不含这些物质;否则改用BCA蛋白质含量测定试剂盒。