YFX0781
50管/48样
¥75
可见分光光度法
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
在酸性溶液中,考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在595nm处有最大吸收峰, 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。
名称 |
规格 |
储存条件 |
试剂一 |
液体×1瓶 |
4℃ |
标准品 |
500μg/mL×1 瓶:临用前用蒸馏水稀释为50μg/mL。 |
4℃ |
1、组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约 0.1g组织,加入1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水)冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)
2、细胞、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间 3min);然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
3、液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。
1、 空白管和标准管只需要测定一次。
2、 加考马斯亮蓝后,在10~20min 内吸光值相对较稳定,因此须在10~20min 完成比色。
3、 不宜用石英比色皿,可用玻璃或塑料比色皿,测完成后立即用 95%乙醇冲洗。
4、 测定前用1~2个样做预实验,确保蛋白浓度在0~1000µg/ml 范围内,否则需要做相应稀释,使得稀释后的结果在 0~1000µg/ml 范围内,然后再乘以稀释倍数。