YFX0095
50管/48样
¥455
可见分光光度法
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)(EC 1.15.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化系统中具有重要作用。
通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-.),O2-.可与WST-8反应产生水溶性染料甲臜,后者在450nm处有吸收;SOD可清除O2-.,从而抑制了甲臜的形成;反应液黄色越深,说明SOD活性愈低,反之活性越高。
名称 |
规格 |
储存条件 |
提取液 |
液体60mL ×1瓶 |
4℃ |
试剂一 |
液体50mL ×1瓶 |
4℃,避光 |
试剂二 |
液体300μL ×1瓶 |
4℃,避光 |
试剂三 |
液体50μL ×1瓶:临用前将试剂三用蒸馏水稀释 100 倍,用多少配多少 。(试剂三和蒸馏水 1 :99 稀释) |
4℃ |
试剂四 |
粉剂 ×2瓶:临用前将一瓶试剂四用300μL试剂五溶解后再加入4.7mL蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 |
4℃ |
试剂五 |
液体1.5mL ×1瓶 |
4℃ |
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、细胞/细菌:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血浆/血清:直接检测。
SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
1、 对照管的范围是0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂三活性低,可以适当减少稀释倍数;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。
2、 若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。