YFX0101
50管/48样
¥120
紫外分光光度法
CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是最主要的 H2O2 清除酶,在活性氧清除系统中具有重要作用。
H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰,CAT 能够分解 H2O2,使反应溶液 240nm 下的吸光度随反应时间而下降,根据吸光度的变化率可计算出 CAT 活性。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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提取液 |
液体60mL ×1瓶 |
4℃ |
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底物母液 |
液体6mL ×1瓶 |
4℃ |
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稀释液 |
液体60mL ×1瓶 |
4℃ |
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工作液的配制:使用前将底物母液用稀释液按照1:9的比例稀释(即:1mL底物母液加入9mL稀释液),充分混匀后使用。 |
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1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)为 1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。
2、细菌或培养细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(ml)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1ml 提取液),超声波破碎细菌或细胞(功率 20%或 200w,超声 3 秒,间隔 10 秒。重复 30 次);8000g 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
1、 如吸光值出现负值,需检查反应过程是否产生大量气泡,气泡多说明酶活性太高,气泡影响产生了负值,可以将样本用提取液稀释一定倍数后再检测。
2、 如果稀释样本后或者反应体系没有产生气泡、但仍然出现较小负值,说明该样本酶活过低,无法被检测到。