谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性检测试剂盒

产品简介

谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）是一种具有多种生理功能的蛋白质家族， 主要存在于细胞质内。GST是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与GSH的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。因此，GST在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。此外，因为GST具有 GSH-Px 活性，亦称为non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。GST 催化的反应减少GSH含量，但是不增加GSSG含量。

GST催化GSH与CDNB结合，其结合产物的光吸收峰波长为340nm；通过测定340nm 波长处吸光度上升速率，即可计算出GST活性。

试剂盒组成

样本处理方式

1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL试剂一）进行冰浴匀浆。8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2、细菌或培养细胞：按照细胞数量（104 个）：试剂一体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后 8000g，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。

3、血液样品：直接测定。

注意事项

1、样品处理等过程均需要在冰上进行，且须在当日测定酶活力。

2、细胞中 GST 的提取时可加试剂一后研磨或超声波处理，不能用细胞裂解液处理细胞。

3、测定前先用 1～2 个样做预实验，如 5min 内反应不成线性，须对样品用蒸馏水稀释，计算结果乘以稀释倍数。

4、若样品测定吸光度大于 1，建议对样品用蒸馏水稀释，计算时结果乘以稀释倍数。

5、测定反映的温度对测定结果有影响，请控制在 25℃或者 37℃（哺乳动物）。