YFX0208
100管/96样
¥550
微量法
SDH(EC 1.3.5.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。SDH 是线粒体的一种标志酶,位于线粒体内膜上的一种膜结合酶,是连接呼吸电子传递和氧化磷酸化的枢纽之一。此外,为多种原核细胞产能的呼吸链提供电子。
SDH 催化琥珀酸脱氢生成延胡索酸,脱下的氢通过吩嗪二甲酯硫酸(PMS)传递还原 2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),并且在 600nm 处具有特征吸收峰,通过 600nm 吸光度的变化,测定 2.6-DPIP 的还原速度,代表 SDH 酶活性。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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试剂一 |
液体100mL ×1瓶 |
-20℃ |
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试剂二 |
液体20mL ×1瓶 |
-20℃ |
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试剂三 |
液体1.5mL ×1瓶 |
-20℃ |
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试剂四 |
粉剂×1瓶 |
-20℃ |
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试剂五 |
粉剂×1支 |
-20℃ |
1、称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10μL试剂三,进行冰浴匀浆。
2、将匀浆液4℃ 600g离心5min。
3、弃沉淀,将上清液转移至另一离心管,4℃ 11000g离心10min。
4、上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 SDH(此步可选做)。
5、向步骤4中的沉淀中加入200μL试剂二和2μL试剂三,超声破碎(冰浴,功率20%或者200W,超声3s,间隔10s,重复30次),用于线粒体SDH酶活的测定。
正式测定前,必需取2-3个预期差异较大的样本做预测定。