丙酮酸脱氢酶（PDH）活性检测试剂盒

产品简介

PDH（EC 4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。

PDH 催化丙酮酸脱氢，同时还原 2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致 605nm 光吸收的减少。

试剂盒组成

样本处理方式

1、称取约0.1g组织、或收集500万细胞/细菌，加入1mL试剂一和10μL试剂三，冰浴匀浆后，600g 4℃离心5min。

2、取上清转移至另一离心管，11000g 4℃离心10min。

3、上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的PDH（此步骤可选做）。

4、向步骤3中的沉淀加入200μL试剂二和2μL试剂三，超声破碎（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），离心取上清液待测。

注意事项

1、 试剂五溶解后用不完的剩余，分装-20℃储存。

2、 试剂四：试剂五：试剂六的工作液要根据样本数量配制用量，现用现配。