线粒体异柠檬酸脱氢酶（ICDHm）活性检测试剂盒

产品简介

ICDHm（EC 1.1.1.41）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中，在三羧酸循中催化异柠檬酸生成α-酮戊二酸，同时将 NAD+ 还原为 NADH，是三羧酸循环的限速酶之一，其催化的反应是细胞NADH 主要来源之一。

ICDHm 催化 NAD+ 还原生成 NADH，导致 340nm 处光吸收上升。

试剂盒组成

样本处理方式

1、称取0.1g 样本或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10μL 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

2、将匀浆液4℃ 600g离心5min。

3、留取沉淀，将上清液转移至另一离心管，4℃ 11000g离心10min。

4、上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的 ICDHm（此步可选做）。

5、向步骤3中的沉淀加入200μL 试剂二和2μL 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率 20％或200W，超声 3 秒，间隔 10 秒，重复 30 次），用于线粒体ICDHm的测定。

注意事项

正式测定前，必需取2-3个预期差异较大的样本做预测定。