己糖激酶（HK）活性检测试剂盒_糖酵解系列_生化检测试剂盒_产品中心

产品简介

HK 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是葡萄糖分解过程中的第一个关键酶，催化葡萄糖转化为 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。

HK 催化葡萄糖合成 6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化 6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH ，NADPH 在 340nm 有特征吸收峰。

名称	规格	储存条件
提取液	液体60mL ×1瓶	4℃
试剂一	液体30mL ×1瓶	4℃
试剂二	粉剂×1瓶：临用前加入 30mL 蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂 4℃保存一周。	4℃
试剂三	液体5mL ×1瓶	4℃
试剂四	粉剂×1支：用时每支加 4mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂 4℃保存一周。	-20℃
试剂五	粉剂×1支：用时每支加 2mL双蒸水充分溶解备用，用不完的试剂 4℃保存一周。	-20℃
试剂六	粉剂×1支：用时每支加250μL试剂一和250μL蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂 4℃保存一周。	-20℃

1、组织：按照质量 (g)：提取液体积(mL)为1：5~10 的比例(建议称取约0. 1g，加入1mL提取液)加入提取液，进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

2、细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细胞数量(104个)：提取液体积(mL) 为 500~1000：1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液)，冰浴超声波破碎细胞 (功率300w，超声3秒，间隔10秒，重复30次)； 8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

3、血清/血浆：直接测定。

1、如果一次性测定样本数较多，可将试剂一、二、三、四、五、六按比例配成混合液，预热 10min。

2、比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。

3、最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。

4、不同匀浆组织中 HK 活力不一样，做正式试验之前请做 1- 2 只预试，若ΔA> 0.5，则说明组织活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液（计算公式中乘以相应稀释倍数），或缩短反应时间至 2min，使ΔA< 0.5，以提高检测灵敏度。