YFX0564
100管/96样
¥390
微量法
H2O2是生物体内最常见的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化产生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。
H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物,在415nm有特征吸收。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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试剂一 |
丙酮100mL ×1瓶 (自备) |
4℃ |
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试剂二 |
粉剂 ×1瓶:临用前加入5mL浓盐酸充分溶解备用。用不完的试剂可 4℃保存1个月;(溶解时间较长,约30min,可40℃-60℃加热溶解,务必提前准备)。 |
4℃,避光 |
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试剂三 |
液体5mL ×1瓶 |
4℃,避光 |
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试剂四 |
液体25mL ×1瓶 |
4℃,避光 |
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标准品 |
液体 ×1瓶:临用前加入1.98mL蒸馏水,充分混匀,即为100μmoL/mL H2O2母液(建议3天内用完)。 |
4℃,避光 |
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆;转移至EP管中,12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、细胞/细菌:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量
(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率300W,超声3s,间隔7s,总时间3min);12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、液体样本:取100μL液体样本,加入900μL试剂一,8000g 4℃离心10min,取上清。
1、 线性范围为0.01-1.2,可测定H2O2浓度范围为0.08-5μmoL/mL,如果样本ΔA大于1.2,建议适当稀释待测样本后重新测定(计算公式中乘以相应稀释倍数),如果ΔA小于0.01,建议适当增加样本量。
2、 本试剂盒所有试剂均有较高挥发性,建议用完后立即密封,减少浪费损失。
3、 丙酮和试剂三均含有刺鼻性气味,需在通风橱中进行操作,并做好防护措施;测定过程中加入试剂三时需沿管壁缓慢滴加,防止液体喷溅。
4、 丙酮会溶解普通塑料吸头,建议使用耐丙酮PP吸头,同时快速吸液、加样,减少丙酮在吸头内挥发产气造成缺量。
5、 为防止对设备造成损害,禁止使用聚苯乙烯(PS)等易被强酸腐蚀材质的96孔板。
6、 过氧化氢为氧化剂,禁止将高浓度过氧化氢母液直接接触丙酮和强酸,以造成爆炸风险。