YFX0166
50管/48样
¥700
可见分光光度法
游离脂肪酸,也称为非酯化脂肪酸,在与白蛋白结合的血浆中循环。动物血液中的游离脂肪酸 (FFA )含量是一项重要的生理生化指标。血清中游离脂肪酸的浓度与脂类代谢、糖代谢、内分泌功能有关,游离脂肪酸的浓度会因为糖尿病、重症肝障碍、甲状腺功能亢进等疾病而上升。
用有机溶剂萃取FFA。含有FFA的有机液与三乙醇胺铜反应,在有机相中形成脂肪酸铜 (铜皂) FFA一Cu。Cu离子与显色液反应形成紫红色络合物。反应形成的颜色深浅与Cu离子浓度的关系符合朗伯一比尔定律,因此可利用此反应进行比色。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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提取液 |
液体60mL ×1瓶 |
4℃,避光 |
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试剂一 |
液体6mL ×1瓶 |
4℃,避光 |
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试剂二 |
液体6mL ×1瓶 |
4℃ |
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试剂三 |
粉剂× 1瓶 |
室温 |
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试剂四 |
粉剂×2瓶:临用前取1瓶加入23mL无水乙醇,充分溶解。未用完的试剂2-8℃可以保存2周。溶解后溶液应为浅黄色,若颜色变为橙红色则失效。 |
4℃,避光 |
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标准品 |
1瓶:取3.9mL萃取液加入瓶中,充分溶解后得到10μmoL/mL的棕榈酸标准溶液,用于绘制标准曲线。 |
室温,避光 |
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空瓶 |
8mL ×4个 |
室温 |
1、组织:用生理盐水冲洗干净后,用吸水纸吸取表面水分,按照组织质量(g):提取液(mL)为1:5的比例(建议称取约0.1g,加入 1.0 mL 提取液),冰浴匀浆后,震荡提取15min,5000rpm,4℃离心5min,取上清液待测。
2、血清或血浆:吸取50μL血清样本,加入1mL提取液,震荡提取15min,5000rpm,4℃离心5min,取上清液待测。
3、细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500-1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液)加入提取液,冰浴超声破碎(功率300w,超声2s,间隔3s,总时间3min),震荡提取15min,5000rpm,4℃离心5min,取上清液待测。
1、 有机溶剂易挥发,尽量在 30min 内完成测量,并且测完后要密封好再丢弃。
2、 必须保证每管的震荡频率及时间一致。
3、 因所用试剂多数为有机溶剂,同一支吸头多次吸取会造成体积不准确,建议更换吸头
4、 蛋白含量不可直接用萃取液提取的有机相待测液直接测定,可用蒸馏水或缓冲液或生理盐水选用本公司的 BCA 法蛋白含量测定试剂盒。
5、 本法中,游离脂肪酸的低检出限为 20nmoL/mL,ΔA的范围为 0.025~1.5,若小于 0.025,可增加样本质量;若大于1.5,需对样本进行稀释,最终计算结果需乘以稀释倍数。
6、 提供的标准曲线及公式仅供参考,若有需要,可用提供的标准品自制标曲(计算公式及线性范围根据自制标准曲线需作对应修改),但需要注意,受仪器及个人操作影响,客户自制标准曲线可能与说明书中提供的标准曲线有差别。若无另外的实验要求,也可直接使用说明书所给标曲进行计算。