总RNA快速提取试剂

产品简介

翼飞雪总RNA快速提取试剂可以在1小时的时间，从动物组织、植物组织、培养细胞、细菌细胞等样本中提取完整的总RNA，提取的总RNA A260/A280值约在1.6~1.8之间。另外，提取过程中加入氯仿后，保留下层的酚相可提取DNA和蛋白质。

本总RNA快速提取试剂可以从1mg组织样本中提取约1-10μg 总RNA，从106培养细胞中提取5-15μg 总RNA，由于本试剂提取的总RNA可以很好的避免DNA或者蛋白质的污染，因此提取产物总RNA可以用于Poly（A+）筛选、体外翻译、RNA印迹分析、斑点杂交、cDNA文库构建、RT-PCR、荧光定量PCR等后续分子生物学实验

产品特点

1、样本适用范围广：可提取植物组织、动物组织、培养细胞、细菌细胞、酵母细胞等样本的总RNA。

2、提取产物完整性好，纯度高。

3、提取产物后续应用范围广。

样本处理方式

1、组织液氮研磨：取适当组织放入研钵中，加入液氮迅速研磨，待组织变软后 继续加入 液氮研磨，反复三次后，按照 1mL总RNA快速提取试剂：50-100mg组织的比例加入提取 试剂，进行后续提取操作。

2、组织匀浆：按照 1mL 总 RNA 快速提取试剂：50-100mg 组织的比例加入提取试剂，用 电动匀浆机充分匀浆 1-2min，进行后续提取操作。 注：裂解产物应呈澄清透明装粘稠液体，如组织为肌肉、脂肪、植物结节部位等富含蛋白、脂肪、多糖的样本，匀浆后可能仍 会残留有部分不溶物质，可 4℃ 12,000g 离心 10min，取上清至于零一洁净离心管中。

3、贴壁培养细胞：按照 1mL 总 RNA 快速提取试剂：10cm2培养细胞的比例加入提取试剂， 直接进行消化裂解，进行后续提取操作。

4、悬浮培养细胞：动物细胞、植物细胞、酵母细胞按照 1mL 总 RNA 快速提取试剂：5×106细胞；细菌细胞按照 1mL 总 RNA 快速提取试剂：5×107细胞的比例加入提取试剂， 直接收集、裂解，进行后续提取操作。

注意事项

1、 RNA 的提取质量，很大程度上决定于样品的选择以及保存方式，因此建议尽 可能使用新鲜的样品提取 RNA。如果样品采集后不能立即进行 RNA 提取，应将新采集的新鲜样本放入液氮 中速冻，然后置于-80℃长期保存。

2、样品采集后立即浸泡在本试剂盒中的样本裂解液中，4℃条件下可保存 1 周。

3、理论上，裂解液体积：样品量的比值越大，提取的 RNA 质量越好。本说明书中的比例仅为推荐比例，最佳使用比例还需用户自行摸索。我们建议不清楚样品中 RNA 含量时， 开始时使用较少的样品进行提取，然后再根据实验具体情况调整样品量。

4、仔细阅读本说明书，每个品牌的产品都有各自特性，切忌按照使用其他品牌 试剂盒的提取经验，来使用本试剂。

5、塑料制品处理：尽可能使用一次性无菌塑料制品，已标明 RNase-Free 的塑料制品， 未开封前可直接使用。未标明 RNase-Free 的塑料制品处理方式：在玻璃杯中倒 入去离子水，加入 DEPC 至其终浓度为 0.1% (DEPC 活性很强的剧毒物，需在通 风橱中小心使用）。将待处理的塑料制品放入一个可高温高压灭菌的容器中，倒 入配制好的 DEPC 水，使塑料制品的所有部分都浸泡在溶液中，在通风橱中 37℃ 或室温下处理过夜。将 DEPC 水小心倒入废液瓶中，将处理过的塑料制品连同容 器以铝箔封口，高温高压灭菌 30min，然后将塑料制品在 80℃烘烤干燥，置于洁净处备用。

6、玻璃和金属制品处理：250℃烘烤 3 小时以上。

7、RNase 另一污染源是移液器，根据移液器制造商的要求对移液器进行处理。 一般情况采用 DEPC 配制的 70%乙醇擦洗移液器的外部和内部，基本达到要求。

应用文献

※ IF=2.7，Guofeng Yang , Xuetao Yu, Yan Zhang，et al.  Screening and Validation of Stable Reference Genes for qRT-PCR Analysis in Epicauta gorhami (Coleoptera: Meloidae), Insects 2024, 15, 942.

※ IF=5.6，Chen Chen,  Daolei Cui,  Jingya Li,  et al. Organophosphorus Flame Retardant TPP-Induced Human Corneal Epithelial Cell Apoptosis through Caspase-Dependent Mitochondrial Pathway. Int. J. Mol. Sci， 2024, 25,4155.

※ IF=9.8，Zi-Yue Yang,  Hai Liu,  Jiang-Ya Li,  et al.  Road dust exposure and human corneal damage in a plateau high geological background provincial capital city: Spatial distribution, sources, bioaccessibility, and cytotoxicity of dust heavy metals. Science of the Total Environment,  912 (2024) 169140.

※ IF=8.3，Zhanyang Qian，Rulin Li，Tianyu Zhao. Blockade of the ADAM8-Fra-1 complex attenuates neuroinfammation by suppressing the Map3k4/MAPKs axis after spinal cord injury. Cellular & Molecular Biology Letters (2024) 29:75.

※ IF=4.0： Chen-Hui Shen, Min Tang， Xiao-Fei Li，et al.  Evaluation of reference gene for quantitative expression analysis in Mylabris sibirica (Coleoptera, Meloidae). Front. Physiol,Volume 15 - 2024 | doi: 10.3389/fphys.2024.1345836.

※ IF=5.8： Jin Qi, Sihang Liu， Zhirui Zhang，et al.  What role does GPR65 play in the progression of osteosarcoma? Its mechanism and clinical significance. Cancer Cell International, (2024) 24:31.

※ IF=8.4：Jie Chang，Zhanyang Qian，Binyu Wang，et al.  Transplantation of A2 type astrocytes promotes neural repair and remyelination after spinal cord injury.Cell Communication and Signaling， 2023 Feb 16; 21(1):37.

※ IF=8.9： Mengying Li，Zheng Chen，Qing Xiong，et al.  Refining health risk assessment of arsenic in wild edible boletus from typical high geochemical background areas: The role of As species, bioavailability, and enterotoxicity. Environmental Pollution，2023 Oct 1:334:122148.

※ IF=9.8： Zi-Yue Yang，Hai Liu，Jing-Ya Li，et al.  Road dust exposure and human corneal damage in a plateau high geological background provincial capital city: Spatial distribution, sources, bioaccessibility, and cytotoxicity of dust heavy metals. Science of the Total Environment，912 (2024) 169140.

※ IF=9.2，Zhijie Ma, Qi Sun, Chengfei Zhang et al.  RHOJ Induces Epithelial-to-Mesenchymal Transition by IL-6/STAT3 to Promote Invasion and Metastasis in Gastric Cancer. Int. J. Biol. Sci.2023; 19(14): 4411-4426.

※ IF=6.780，Xin-Ni Bin, Ying-Bin Gao, Miao Pan et al.  Anti-inflammatory effects of 6S-5-methyltetrahydrofolate-calcium on RAW264.7 cells and zebrafish. Life Sciences: 327 (2023) 121839.

※  IF= 5.895. Minghui Li，Wei Lu，Yuanyuan Meng， et al. Tetrahydroxy Stilbene Glucoside Alleviates Ischemic Stroke by Regulating Conformation-Dependent Intracellular Distribution of PKM2 for M2 Macrophage Polarization. Journal of Agricultural and Food Chemistry, December 5, 2022.

※  IF= 6.208. Jian-Xiang Liu, Dao-Lei Cui, Dan-Lei Yang, et al. Organophosphorus Flame Retardant TCPP Induces Cellular Senescence in Normal Human Skin Keratinocytes: Implication for Skin Aging.Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 14306.

※  IF=7.035. Jian-Wei Su，Pei Yang，Mei-Mei Xing， et al. Neuroprotective effects of a lead compound from coral via modulation of the orphan nuclear receptor Nurr1. CNS Neurosci Ther. 2022;00:1–14.

※  IF=10.753. Kun Wang，Jiao-Yang Ma，Meng-Ying Li，et al. Mechanisms of Cd and Cu induced toxicity in human gastric epithelial cells:Oxidative stress, cell cycle arrest and apoptosis. Science of The Total Environment，Volume 756, 20 February 2021, 143951.

※  IF=9.584. Mingjie Xia，Xinyu Li，Suhui Ye，et al.FANCC defciency mediates microglial pyroptosis and secondary neuronal apoptosis in spinal cord contusion. Cell Biosci. 2022 Jun 3;12(1):82.

※  IF=5.135. Zhan-Yang Qian，Ren-Yi Kong，Sheng Zhang，et al. Ruxolitinib attenuates secondary injury after traumatic spinal cord injury. Neural Regeneration Research . DOI: 10.4103/1673-5374.335165.

※  IF=6.580. Zhanyang Qian，Hongtao Chen，Mingjie Xia，et al. Activation of glucagon-like peptide-1 receptor in microglia attenuates neuroinflammation-induced glial scarring via rescuing Arf and Rho GAP adapter protein 3 expressions after nerve injury. International Journal of Biological Sciences . 16 Jan 2022, 18(4):1328-1346.

※  IF=5.083. Shuai Jiang，Yandan Wu，Shunjie Wu，et al. Silencing TAK1 reduces MAPKs-MMP2/9 expression to reduce inflammation-driven neurohistological disruption post spinal cord injury. Cell Death Discovery volume 7, Article number: 96 (2021).

※  IF=3.943. Mengwen Li，Xinsheng Fan，Qinfei Yue，et al. The neuro-immune interaction in airway inflammation through TRPA1 expression in CD4+ T cells of asthmatic mice. Int Immunopharmacol. 2020 Sep;86:106696