YFXM0017
50T
¥900
翼飞雪土壤总 RNA 提取试剂盒采用独特的疏水膜技术,彻底去除样品中蛋白和 DNA 等干扰物,从而提取高纯度的 RNA。试剂盒采用独特的缓冲系统,可从各种复杂的土壤、污泥中快速提取总 RNA。
本试剂盒提取得到的 RNA 纯度较高,去除抑制下游反应的物质,避免因 RNA 不纯引起实验失败。
1、试剂盒中含有独特的柱膜平衡液,可以将柱膜表面 pH 值预先恢复到 RNA 最 佳吸附 值,确保总 RNA 的提取产量; 同时也可以对柱膜起到洗涤作用,提高总 RNA 的纯度。
2、提取过程无需接触、使用氯仿等有毒试剂,最大限度保证了操作的生物安全性。
3、提取得到的 RNA 纯度较高,去除抑制下游反应的物质,避免因 RNA 不纯引起实验失败。
根据不同条件选择适合的方法:
1、 液氮研磨:取300-600mg新鲜土样于研钵中,加入适量液氮,迅速研磨至土样破碎,再加适量液氮研磨,重复三次后,将土样迅速转入2mL无酶离心管,加入700-1000μL Yfxbio® LS,混匀2min。
2、 直接研磨:将新鲜土样放入研钵,按照1mL Yfxbio® LS:500mg 土样的比例混合后,匀浆研磨,转入一新的1.5mL无酶离心管。(推荐此法)
注:1)绝大部分情况下,Yfxbio® LS中不加入beta巯基乙醇,对于提取效果没有明显影响。
2)使用液氮研磨法时,研磨和转移都要迅速,且要保持样品始终为冻干状态。
3)使用直接研磨法时,可以在通风橱中进行,避免beta-巯基乙醇散发的恶臭味。
4)直接研磨时,如粪便样品>500mg,LS的使用量需按比例增加; 但样品<500mg时,LS的使用量不得低于1mL。
1、详细阅读本说明书各步骤,并准备好所有的试剂盒组分、研钵、研棒、药匙、1.5mL和2mL RNase-Free灭菌离心管、 75%乙醇、异丙醇、beta巯基乙醇、37℃和 65℃的温浴条件。
2、相关器材的处理:
2.1 塑料制品:尽可能使用一次性无菌塑料制品,已标明RNase-Free的塑料制品,未开封前可直接使用。未标明RNase-Free的塑料制品处理方式:在玻璃杯中倒入去离子水,加入DEPC至其终浓度为 0.1% (DEPC活性很强的剧毒物,需在通风橱中小心使用)。将待处理的塑料制品放入一个可高温高压灭菌的容器中,倒入配制好的DEPC水,使塑料制品的所有部分都浸泡在溶液中,在通风橱中37°C或室温下处理过夜。将 DEPC水小心倒入废液瓶中,将处理过的塑料制品连同容器以铝箔封口,高温高压灭菌30min,然后将塑料制品在80°C烘烤干燥,置于洁净处备用。
2.2 玻璃和金属制品:250°C 烘烤3h以上。
2.3 电泳槽等可以用0.2M 的NaOH 浸泡,并用纯水漂洗。
2.4 RNase 另一污染源是移液器,根据移液器制造商的要求对移液器进行处理。一般情况采用DEPC配制的70%乙醇擦洗移液器的外部和内部,基本达到要求。
2.5 全程佩戴一次性手套,并经常更换。