4，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI ）

产品简介

DAPI是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂，它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光，亮度增强约20倍。DAPI常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI具有很高的光漂白承受水平，能用来检测酵母线粒体DNA、叶绿体DNA、病毒DNA以及染色体DNA等。

在较低浓度（1 µg/mL）时，DAPI不可渗透于活细胞，但可用作固定细胞或组织部分的核染色剂。在较高浓度（10 µg/mL）时，DAPI可用于染色活细胞。

产品特点

实验案例

使用方法（仅供参考）

对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。如果要进行免疫荧光染色，染色完成后再进行 DAPI 染色。如果 不需要进行其他染色，则直接进行后续的 DAPI 染色。

1. 用 ddH2O 将DAPI 溶解，制得1 mg/mL DAPI 水溶液，-20℃避光保存。

2. 取适量DAPI水溶液加到PBS中，制备成5 µg/mL 的DAPI溶液。

3. 对于贴壁细胞（去除孔板中的培养基）或组织切片，加入少量 DAPI 染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积3倍的染色液，混匀。

4. 在室温培养细胞 10～20 min。

5. 用 PBS 或合适的缓冲液洗细胞两次，每次 3-5 min，洗涤完成后加入50 μL PBS 防止细胞干掉。

6. 用带有 360 nm 激发波长，460 nm 发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意事项

1、使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2、相较于染色细菌，DAPI 染料对哺乳动物细胞染色更加灵敏，染色死活细菌时推荐在 PBS 或 150 mM NaCl 中溶解为终浓度 10 μg/mL 的染色液，室温染色 30 min。通常对于死细胞的染色要比活细胞染色亮度高。

3、用于细胞核染色时，推荐DAPI 工作浓度为 0.5-10 μg/mL。

4、荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓淬灭。

5、DAPI 对人体有害，请穿实验服并戴一次性手套操作，注意适当防护。