YFX0705
50管/24样
￥580
可见分光光度计法
DPPH 自由基一种很稳定的氮中心的自由基，是样本抗氧化能力的重要指标之一，广泛应用于抗氧化类食品、保健品及药品的研究中。
DPPH 自由基有单电子，其醇溶液呈紫色，在 515 nm 处有强吸收。当有抗氧化剂存在时，DPPH 自由基被清除，其溶液颜色变浅，515 nm 的吸光度下降，在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。本试剂盒中，通过吸光度下降的程度来反映样本清除 DPPH 自由基的能力。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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提取液 |
液体50mL ×1瓶 |
4℃ |
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试剂一 |
无水乙醇60mL ×1瓶，自备。 |
室温 |
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试剂二 |
粉剂×1 支（0.6 mL EP 管放于 8 mL 试剂瓶中），4℃保存。临用前加入 6.08 mL 试剂一振荡溶解，用不完的试剂可于-20℃保存一月，建议分装保存；临用前根据试验所需量按照试剂二： 试剂一（V:V）= 4：21 的比例配制成工作液，现配现用，用不完的工作液可于 4℃保存一周。 |
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试剂三 |
粉剂×1 支，10 mg 维生素 C，4℃保存。临用前加入 1 mL 提取液，充分振荡溶解；配成 10 mg/mL 维生素 C 溶液，用于阳性对照。 |
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1、植物组织：将新鲜样品置于 60℃烘箱烘干至恒重，研钵研碎（或粉碎机粉碎），过 30~50目筛；称取约 0.05 g 样本，加入 1 mL 提取液后置于 40℃水浴锅中浸提 30 min；10000 rpm 室温离心 10 min，取上清，置于冰上待测。
2、动物组织：收集0.1g 组织，加入1.0mL提取液，匀浆或超声以充分破碎细胞并释放其中的抗氧化物，4℃、10000rpm 离心5min，取上清待测。
3、细胞/细菌：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
4、红酒、果汁等液体样本：吸取 100 μL 样本溶液加入 900 μL 提取液，旋涡振荡混匀，室温10000 rpm 离心 10 min，取上清，置冰上待测。
5、提取物或者药物：可用提取液配制成一定浓度，如 5 mg/mL。
1、 同样本清除 DPPH 自由基的能力可能相差很大，如果要比较不同样品的 DPPH 自由基清除能力，建议对于同一批样品加入等量的样品，红酒、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积，提取物（或者药物）配制成同样浓度。在比较时，将样本根据预实验结果进行适当调整，比较同样浓度（相同稀释倍数）的清除率大小。
2、 不同样本清除 DPPH 自由基的能力可能相差很大，为保证实验结果的准确性，样本要根据预实验结果进行适当调整（如清除率大于 90%，建议将提取的样本用提取液进行稀释；清除率小于 5%， 建议加大烘干样本质量或液体样本体积进行提取）。
3、 样品建议当天提取当天检测。
