YFX0701
100T
￥750
翼飞雪改良型ATP含量检测试剂盒，提供了一种简便的细胞、组织、其他生物样本中ATP含量检测的方法。试剂盒在1nM-5,000 nM 范围内有良好的检测灵敏度，线性范围宽。检测过程简单快速，结果稳定可靠，可在30-60min内检测完毕。
ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定 ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。
ATP 在荧光素酶 (Firefly Luciferase) 的作用下与底物荧光素 (Luciferin) 反应产生荧光。当荧光素酶和底物荧光素均过量时，在一定浓度范围内荧光强度与 ATP 浓度成正比，通过测定荧光强度检测样品中 ATP 浓度。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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试剂一 |
100μL （100×） |
-20℃ |
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试剂二 |
1mL （10×） |
-20℃ |
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试剂三 |
3mL （10×） |
-20℃ |
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试剂四 |
100μL （100×） |
-20℃ |
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ATP标准液 |
250μL （0.5mM） |
-20℃ |
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ATP检测缓冲液 |
1.8mL （20×） |
-20℃ |
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1、ATP检测工作液的配置：分别吸取40μL试剂一、400μL试剂二、40μL试剂四、3250μL检测缓冲液，充分混匀，配置成4mL检测工作液（可根据实际情况进行等倍放大）。 2、1×ATP检测缓冲液的配置：提前将待用试剂冰上解冻，按照每个样品或标准品100μL ATP检测工作液，取适量ATP检测缓冲液（20×）用超纯水稀释20倍，配置成1×ATP检测缓冲液，置于冰上待用。 3、裂解液的配置：取适量试剂三（10×）用1×ATP检测缓冲液稀释10倍，配置成1×裂解液。 4、标准溶液的制备：提前将待用试剂置于冰上解冻，用裂解液稀释 ATP 标准溶液稀释成适当的浓度梯度。初次检测可设置浓度范围为 1-5,000nM（如0.01μM, 0.03μM, 0.1μM, 0.3μM, 1μM, 3μM, 10μM）。在后续实验中可以根据样品中ATP浓度对标准品的浓度范围进行适当调整。 |
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1、组织：称取约20mg组织，加入100-200μL裂解液，冰浴匀浆使组织完全裂解。12000g 4℃离心5min，取上清，置冰上待测。
2、贴壁细胞：去培养液，按照6孔板（细胞数量：200-500万）每孔加入150-200μL裂解液（约1/10培养液体积）裂解细胞（可使用移液器反复吹吸裂解液，使细胞充分裂解）。12000g 4℃离心5min，取上清，置冰上待测。
3、悬浮细胞：离心收集细胞，按照6孔板（细胞数量：200-500万）每孔加入200μL裂解液（约1/10培养液体积）裂解细胞（可使用移液器反复吹吸裂解液，使细胞充分裂解）。12000g 4℃离心5min，取上清，置冰上待测。
1、样品体积可根据样品中ATP的含量在10-100μL范围内调整，但需保持标准品体积与待测样品体积一致。
2、如果待测样品中ATP含量过高，可用1×ATP检测缓冲液稀释后再进行检测。
3、本试剂盒在1-5000nM标准品体系中有良好的线性关系。
4、ATP检测试剂中有荧光素酶 (Firefly Luciferase)，冻融会使其失活，应避免反复冻融，建议ATP检测试剂稀释后一次性用完。
5、ATP不稳定，裂解后样品需在4℃或冰上操作。ATP在冰上可稳定6h。
6、本试剂盒需配套使用化学发光仪（检测荧光素酶报告基因的仪器），如果没有可选择液闪仪检测，检测灵敏度取决于液闪仪的灵敏度和精确度。
7、使用化学发光的多功能酶标仪时，建议配套不透光的96孔白板或黑板。
8、如果检测样品中ATP含量水平远低于预期，裂解后可取部分样品煮沸2min充分释放ATP 再离心进行后续检测。
9、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。
10、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
