改良型 氧化型/还原型谷胱甘肽含量检测试剂盒

产品简介

翼飞雪氧化型/还原型谷胱甘肽含量检测试剂盒适用于定量检测组织、细胞、全血、血浆、血清、尿液等样本中的还原型和氧化型谷胱甘肽（GSH/ GSSG）的含量，本试剂盒的线性检测范围为0.1-3μM GSH，检测下限为10nM GSH。

谷胱甘肽是由甘氨酸、谷氨酸、半胱氨酸组成的三肽，在许多生物过程中（包括蛋白质和DNA合成、氨基酸转运、氧化应激保护等）发挥着关键作用，是保护细胞免受活性氧损伤的主要抗氧化剂之一。还原型谷胱甘肽（GSH）可将细胞质蛋白质中的二硫键还原为半胱氨酸，自身转化为氧化型谷胱甘肽（GSSG）。

翼飞雪氧化型/还原型谷胱甘肽检测试剂盒基于 5,5’-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸) (5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid, DTNB) 和谷胱甘肽还原酶 (GR) 之间的酶解反应，可准确检测生物样本中的总谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽 (GSH) 和氧化型谷胱甘肽 (GSSG) 含量。检测原理为DTNB与还原型谷胱甘肽 (GSH) 反应生成黄色 2-硝基-5-巯基苯甲酸 (TNB)，2-硝基-5-巯基苯甲酸 (TNB) 在412nm处的吸光度与样品中的谷胱甘肽浓度成正比。本试剂盒还可用于检测氧化谷胱甘肽 (GSSG)，先使用1-甲基-2-乙烯基吡啶鎓三氯酸盐作为清除剂试剂清除所有现有的谷胱甘肽再进行检测。

试剂盒组成

样本处理方式

1、组织：组织样品剪碎后液氮速冻，然后迅速研磨成粉末。按照10mg组织粉末：100μL蛋白去除剂的比例，充分混匀并用玻璃匀浆仪充分匀浆，4℃孵育10min，4℃ 10000g离心10min，取上清代待测。

2、细胞：收集细胞并用PBS洗涤一次，加入3-5倍细胞沉淀体积的蛋白去除剂，充分混匀，超声波破碎，4℃ 10000g离心10min，取上清待测。

3、红细胞或血浆：取新鲜血液600g离心10min，上清部分为血浆直接吸取、待测；沉淀部分即为红细胞，用PBS洗涤红细胞2次，取 50μL红细胞沉淀，加入50μL蛋白去除试剂，4℃或冰浴充分混匀。超声裂解细胞，4℃ 10000 g离心10min，取上清待测。

注：  1）容易匀浆的组织可直接快速匀浆，无需液氮速冻。

2）样品立即检测可置于4℃短期储存，短期内不能检测可-80℃储存，但时间不能超过1周。

3）样品裂解后需立即转移至冰上，以防GSH在空气中氧化成GSSG。

注意事项

1、 本试剂盒检测时涉及氧化还原反应，所有氧化剂或还原剂都会干扰本试剂盒的测定，特别是DTT、beta-巯基乙醇、半胱氨酸还原剂、马来酰亚胺化合物等会严重干扰谷胱甘肽的测定，请尽量避免。

2、 如果测定值超过现行范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。