YFX-CLH192
1×106cells/T25培养瓶
￥1800
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背景描述 |
SU-DHL-2 是一种组织细胞系，于 1974 年从一名患有大细胞淋巴瘤的 73 岁白人女性的淋巴结中分离出来。该细胞系可用于免疫学研究。这些细胞中的大多数是超二倍体，具有 51 条染色体的尖锐模态数；偶尔也可以看到超四倍体范围内的细胞。观察到微小的标记染色体，并且在 A、B、C 和 F 组中观察到染色体数量增加。该细胞呈非特异性酯酶和酸性磷酸酶阳性。细胞对 Epstein-Barr 病毒核抗原 (EBNA-) 呈阴性。细胞表面 Ig 阴性 (sIG-)。据报道这些细胞是E-玫瑰花结阴性的。ATCC 通过 PCR 确认该细胞系对 Epstein-Barr 病毒 DNA 序列的存在呈阳性。 |
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细胞形态 |
淋巴母细胞，悬浮、多细胞聚集体生长。 |
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规格 |
>1x106 细胞数量，T25瓶或者1mL冻存管包装。 |
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细胞来源 |
B淋巴细胞。 |
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培养基 |
RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S。 |
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培养条件 |
气相：空气，95%；二氧化碳，5%； 温度：37℃；培养箱湿度为70%-80%。 |
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细胞检测 |
不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
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传代比例 |
1:2-1:5；第一次收到细胞建议T25培养瓶1：2传代。 |
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换液频率 |
2-3天。 |
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细胞冻存液 |
无血清冻存液。 |
1、收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。
2、请在4或5×显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。
3、悬浮细胞：T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟，弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中（加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基）。
4、备注：运输用的培养基不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1：2传代 。
对于悬浮细胞传代可以参考以下方法：
悬浮状态下生长的细胞，可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态，一般情况下细胞密度维持在1×105~1×106个/mL（不同细胞对密度要求不同，）可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm，离心5min，弃去上清，补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。下面T25瓶为例；
1、选择指数生长期的细胞，吸去培养液，加PBS清洗1-2遍。去PBS，加入0.25% 胰酶1.5mL润洗10秒，去胰酶。将培养瓶放37度培养箱，靠残余胰酶继续消化细胞直至细胞变圆，拍打瓶侧使细胞脱落。细胞消化下来后，加5mL培养液全部吹打下来，再1000RPM离心3分钟。
2、加入1-1.5mL成品冻存液，分装至2mL冻存管里，将冻存管放入充满异丙醇的程序降温盒中，之后转入-80℃度冰箱过夜，第二天再转至液氮。
1、将恒温水浴锅中的水预热到37℃。
2、准备一支15ml 离心管，加入5ml 完全培养基，放入 37℃水浴锅中预热。
3、戴上护目镜，厚毛线手套后，从液氮罐中取出要复苏的细胞，尽快转入 37℃恒温水浴锅中复温晃动冻存管以提高复温速率。
4、将融化了的冻存管中的细胞吸入事先准备的离心管中，混匀后，1000rpm 离心 5min。
5、准备一个 T-25 培养瓶，写上细胞名称、日期，再加入 4ml 完全培养基。
6、离心完成后弃去上清，用 1ml 完全培养基重悬细胞后，转入 T-25 细胞培养中，混匀后转入CO2 培养箱中培养静置。
1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
2、从液氮中取出细胞冻存管时，若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，置于干冰上，然后放入 37℃水浴中，避免温差太大造成液氮快速气化而爆炸。
