改良型乳酸脱氢酶（LDH）活性检测试剂盒

产品简介

乳酸脱氢酶（Lactate Dehydrogenase，LDH）（EC 1.1.1.27）是存在于细胞质的一种酶，当细胞膜受到损伤时，LDH会释放到培养基中。由于释放出的LDH稳定，检测培养基中LDH量可以作为测定死细胞和受损细胞数量的指标。

乳酸脱氢酶（LDH）活性检测试剂盒是通过测定细胞释放到培养基中的乳酸脱氢酶 (LDH) 活性进而测定细胞损害的试剂盒。本试剂盒可以测定受损细胞所释放出的LDH，其原理是LDH催化乳酸生成丙酮酸和NADH，NADH通过电子载体可将水溶性四唑盐(黄色) 还原成甲臜产物 (红色)，甲臜产物的吸光度与LDH量呈正比，利用此原理可以测定死细胞和受损细胞的数量。

本试剂盒中的试剂对细胞无害，可以直接添加到含有细胞的培养基中检测(直接法)。也可以分离细胞后，加到培养基中检测 (间接法，分离的细胞可以做其他实验)。

试剂盒组成

注意事项

1、 96孔板的选择：直接法检测时，贴壁细胞和悬浮细胞都使用平底96孔板；间接法检测时，贴壁细胞使用平底96孔板，悬浮细胞使用圆底或V底96孔板。

2、 加入工作液后，吸光度与反应时间成正比，建议0-30min内检测。由于不同细胞差异较大，建议首次检测时，分别测定0min、5min、10min、20min、30min时的吸光值，以便确定最佳反应时间。

3、 使用96孔板进行检测时，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题：由于96孔板边缘孔最容易蒸发，建议弃用边缘孔、改加相同量的PBS或者水或者培养液；或者把96孔板放在靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。

4、 检测前需要确保孔内没有气泡，否则会干扰测定结果。

5、 建议使用多通道移液器加样，以减小平行孔间的差异。

6、 由于血清含有乳酸脱氢酶，建议血清的使用浓度不要超过1%，并最好使用热灭活血清。如果一定需要使用10%血清，在检测时一定要设置背景空白（仅含培养基），以用于消除背景。

7、 细胞过度生长、密度过大、离心速度过大、培养箱内温差过大等因素，都会造成细胞释放乳酸脱氢酶增加。

8、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

9、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。